Novos insights sobre hemofilia podem minimizar ou eliminar efeitos colaterais no futuro

O bloqueio dos receptores de endocitose durante a pré-incubação de APCs modula a apresentação de peptídeos derivados de FVIII e a subsequente estimulação de clones de hibridoma de células T CD4+ específicas de peptídeos de FVIII. As APCs foram pré-incubadas com agentes bloqueadores específicos para receptores de endocitose que estão associados à endocitose de FVIII: Galactose 5mM para bloquear os receptores de asialoglicoproteína (ASGPR); 100µg/mL de Heparina para bloquear proteoglicanos de sulfato de heparano (HSGP), 2mg/mL de Manana ou 10µg/mL de um anticorpo monoclonal específico para bloquear o Receptor de Manose, 14,4 µg/mL de LRPAP1 de camundongo recombinante para bloquear a proteína relacionada ao receptor de lipoproteína de baixa densidade -1 (LRP1), 1,25mM e 5mM EDTA para inibir a função dos receptores dependentes de íons bivalentes. Após 3 horas de incubação, as APCs foram lavadas e subsequentemente cocultivadas com clones de hibridoma de células T CD4+ específicas de FVIII cobrindo os 9 epítopos de células T CD4 reconhecidos pela biblioteca de hibridomas. A liberação relativa de IL-2 como um indicador para a ativação de clones de hibridoma em relação ao controle FVIII normal (100%) é apresentada. Está representado o valor médio derivado de 2 experimentos independentes feitos em triplicado (n=6). Crédito: Fronteiras da Imunologia (2022). DOI: 10.3389/fimmu.2022.975680

As respostas imunes contra o Fator VIII, que é usado para tratar a hemofilia A (distúrbio hemorrágico), são influenciadas pelo microambiente das células apresentadoras de antígenos. Este é o resultado de um estudo científico realizado em cooperação entre o Institute Krems Bioanalytics da IMC University of Applied Sciences Krems e a empresa farmacêutica internacional Takeda, que foi recentemente publicado na revista Fronteiras da Imunologia.

Neste estudo, um modelo de cultura celular foi usado para investigar o impacto do microambiente na captação e processamento do fator VIII em células apresentadoras de antígenos. As alterações observadas no processamento de proteínas podem ter efeitos profundos nas respostas imunes ao FVIII. Os novos dados fornecem a base para o desenvolvimento de futuras terapias de FVIII que provocam respostas imunes mínimas em pacientes.

A hemofilia A é um distúrbio hemorrágico hereditário causado pela ausência ou deficiência do fator de coagulação VIII (FVIII) ativo no sangue. Os pacientes são, portanto, tratados com terapia de reposição de FVIII.

Uma das principais complicações dessa terapia é o desenvolvimento de uma reação imune neutralizante em 30% dos pacientes, tornando ineficaz o FVIII administrado. Ainda não está claro por que essa complicação ocorre em algumas pessoas enquanto outras são poupadas – e é exatamente essa questão que o grupo de pesquisa de Takeda e IMC Krems, liderado pelo Dr. Christian Lubich, se propôs a abordar.

Resposta imune adversa

“O projeto experimental de nosso estudo de cultura de células”, declarou o Dr. Lubich, “foi direcionado para uma análise mais detalhada da resposta de diferentes células imunológicas no contexto da administração de FVIII e, assim, obter uma melhor compreensão dos processos subjacentes.”

E, de fato, os dados do estudo sugerem uma ligação crucial entre o microambiente específico durante a captação do FVIII por células imunes específicas – as chamadas células apresentadoras de antígenos (APCs) – e as proteínas FVIII (antígenos) apresentadas por essas células em seus Superfície celular. Dependendo do microambiente, a composição dessas proteínas de superfície difere e, portanto, também influencia a especificidade do CD4+T subsequentemente ativado célulasresultando em parte na neutralização indesejada resposta imune.

Nova tecnologia

Para verificar a relevância dos dados também in vivo, agora seria útil realizar um estudo de acompanhamento em humanos. O Dr. Lubich e sua equipe do Institute of Krems Bioanalytics já têm uma ideia para isso, baseada em um nova tecnologia promissora: “A imunopetidômica é um método pioneiro para investigação da composição e dinâmica de proteínas apresentadas por células apresentadoras de antígeno com o auxílio de espectrometria de massa.”

“Este método pode ser usado, por exemplo, para determinar peptídeos de um patógeno, uma célula tumoral ou, como neste caso, um agente bioterapêutico que provoca uma resposta imune. Esta plataforma, portanto, não só ajudará a entender melhor as reações adversas do imunológico aos bioterapêuticos, mas também permitirá a identificação de antígenos importantes para o desenvolvimento de imunoterapias.”

Fornecido por IMC Krems